第 182-3條 本標準適用於雞球蟲症之病原（E. maxima, E. mivati, E. acervulina, E. tenella），經球蟲陰性之禽類腸道增殖後，分離球蟲卵囊製成活蟲製 劑之檢定。 第 182-4條 檢驗雞球蟲活蟲疫苗須符合下列條件： 一、特性試驗：須具固有理學性狀，且無異物及異常氣味。 二、微生物限量試驗：不得含有任何可能檢出之病原細菌（如沙氏桿菌、 溶血性大腸桿菌、梭狀芽孢桿菌等），每劑量疫苗中非病原性細菌不 得超過一○個。 三、病毒迷入否定試驗：取磷酸緩衝溶液稀釋之疫苗一○公撮加入玻璃珠 （glass beads ；直徑○‧○一至○‧一一公釐）後，高速震盪五分 鐘，再以 6,000g 離心一○分鐘，取上清液○、一公撮接種於三個九 至十一日齡雞胚胎尿囊腔內，另取二個為對照，於攝氏三十七度培養 七日後，抽取尿囊液並檢查胚胎須無任何病變或死亡；再將抽取之尿 囊液接種於三個九至十一日齡雞胚胎尿囊腔內，另二個為對照，於攝 氏三十七度培養七日後，檢查胚胎須無任何病變或死亡，尿囊液與等 量五％雞紅血球混合，須無平板凝集反應。 四、活蟲卵數試驗：每劑量已芽孢化球蟲卵囊不得少於九○○個。 五、安全試驗：選一至七日齡 SPF 雞十五隻，分成 A、B、C 三組，每 組各五隻，A 組為對照，B 組以口服接種疫苗，每隻一○劑量，C 組 以皮下接種疫苗，每隻亦一○劑量，接種後連續觀察三週，所有雞隻 應無不良反應而健存，犧牲剖檢腸道應無明顯之球蟲感染病灶。 前項試驗確定困難時，應予複檢。 第 182-5條 本標準適用於應用基因重組技術表現第二型豬環狀病毒（Porcine circo- virus type 2；PCV2）之第二開放閱讀框架（Open reading frame 2；OR F2）基因，經細胞增殖培養及不活化後加入適當佐劑之疫苗檢定。 第 182-6條 被檢豬環狀病毒感染症基因重組不活化疫苗須符合下列條件： 一、特性試驗：須具固有理學性狀，且無異物及異常氣味。 二、無菌試驗：不得含有任何可能檢出之活菌。 三、防腐劑含有量試驗：甲醛（Formaldehyde）含有量須為 0.2 ％以下 ，硫柳汞（Thimer osal）須為 0.01 ％以下。 四、不活化試驗：依原廠說明書進行不活化試驗，須無檢出環狀病毒特異 性螢光或細胞病變效應。 五、抗原含有量試驗：以酵素結合免疫吸附分析法（ELISA） 測定被檢疫 苗不活化 PCV2 抗原之相對效價（Relative potency；RP），試驗方 法依原廠提供 ELISA 抗原和程序製備測試盤，並依原廠提供之試劑 、抗體、陰性對照品、陽性對照品與標準抗原進行測試，測試後之吸 光值以 Relpot 4.0 軟體（U.S. Department of Agric ulture, Ce- nter for Veterinary Biologics Program’s Relative Potency C- alculation Software, May 22, 2002） 或最新版本軟體，計算 RP 值，RP 值必須≧ 1。 六、安全試驗： （一）小白鼠：選用時三至十五公克健康小白鼠五隻，皮下注射十分之一 劑量，接種後觀察十四天，不得有任何不良反應而健存。 （二）天竺鼠：選用二百五十至三百克健康天竺鼠三隻，皮下注射一劑量 ，接種後觀察十四天，不得有任何不良反應而健存。 （三）豬：選用三至四週齡無特定病原（Specific pathog en free；SPF ）小豬三頭，取二頭以肌肉注射接種本疫苗二劑量，另一頭為對照 組，接種後觀察二十一天，均須無任何不良反應而健存。 前項試驗確定困難時，應予複檢。
